是否进口否 | 产地上海 |
级别色谱纯 | 含量98% |
品牌DM | 用途范围科研 |
产品名称芍药内酯苷 | 是否危险化学品否 |
货号DM-0092 | 产品规格20mg |
CAS39011-90-0 |
芍药内酯苷
操作步骤
实验开始前,请提前配置好所有试剂,试剂或样品稀释时,均需混匀,混匀时尽量避免起泡。每次检测都应该做标准曲线。如样品浓度过高时,用样品稀释液进行稀释,以使样品符合试剂盒的检测范围。
1.加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或待测样品100μl,注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37℃反应120分钟。
为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。
2.弃去液体,甩干,不用洗涤。每孔加生物素标记抗体工作液 100μl(取1μl生物素标记抗体加99μl生物素标记抗体稀释液的比例配制,轻轻混匀,在使用前一小时内配制),37℃,60分钟。
3.温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干。
4.每孔加辣根过氧化物酶标记亲和素工作液(同生物素标记抗体工作液) 100μl,37℃,60分钟。
5.温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干。
6.依序每孔加底物溶液90μl,37℃避光显色(30分钟内,此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度蓝色,后3-4孔梯度不明显,即可终止)。
7.依序每孔加终止溶液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。
8.用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(od值)。 在加终止液后15分钟以内进行检测。
芍药内酯苷
性能:
1.准确性:标准品线性回归与预期浓度相关系数r值,大于等于0.9900。
2.灵敏度:***低检测浓度小于10 pg/ml。
3.特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。
4.重复性:板内、板间变异系数均小于15%。
上海笃玛生物科技有限公司包被抗体均使用进口抗体,质量稳定,性价比高
优势:
1.高效,灵敏,特异的抗体
2.稳定的重复性和可靠性
3.吸附性能好,空白值低,孔底透明度高和固相载体
4.适用血清,血浆,组织匀浆液,细胞培养上清液,尿液等多种标本类型
上海笃玛生物科技有限公司供应的经国家认证,以免疫学反应为基础,在同等质量条件下通过大规模生产或技术进步降低成本,并得到权威的确证方法和确证的样品进行检测。公司专业提供各种种属,供应的elisa试剂盒统一价销售。
芍药内酯苷
常用标签包括有flag、myc、ha、his、gst、gfp、mbp等。
flag标签系统利用一个短的亲水性八氨基酸肽(dykddddk)融合到目标蛋白;其纯化条件是非变性的,因此可以纯化所有有活性的融合蛋白。
his标签是由6个组氨酸(his-his-his-his-his-his)组成的短肽,专门设计用于重组蛋白的吸附纯化。由于分子量小,且较容易分离和纯化,是目前使用***广泛的一种。
gst标签体系具有蛋白表达率高,表达产物纯化方便,利于gst抗体制备的特点。gst融合蛋白在水溶液中可溶,可从细菌裂解液中提取,在不变性的条件下通过亲和层析得到。
gfp或其突变体egfp等广泛用于基因表达效率的检测,以及和目的蛋白融合表达用于检测目的蛋白的表达和分别。gfp抗体不经可以检测gfp或其适当的突变体,也可以检测和gfp或其适当的突变体融合表达蛋白的表达、细胞内定位,以及纯化、定性或定量检测gfp融合表达蛋白等。
myc标签(序列为:eqkliseedl)已成功应用于wb杂交技术、免疫沉淀ip和流式细胞术中。因此可用于检测重组蛋白在细菌、酵母、昆虫细胞和哺乳细胞中的表达情况。myc重组蛋白质可通过偶联myc标签抗体到活化的琼脂糖上而进行亲和纯化。但myc重组蛋白的低ph洗脱条件往往会降低蛋白质的活力,因此myc标签系统广泛应用于检测但很少用于纯化。
ha标签系统利用一个ha(influenza hemagglutintin epitope:ypydvpdya)短肽融合到目标蛋白。ha标签可位于蛋白质的c端或n端,该系统已广泛应用于多种细胞类型,相应的ha标签抗体也被广泛运用。
mbp标签蛋白大小为40kda,由大肠杆菌k12的male基因编码。mbp可增加在细菌中过量表达的融合蛋白的溶解性,尤其是真核蛋白。如果蛋白在细菌中表达,mbp可以融合在蛋白的n端或c端。可用mbp抗体或表达的目的蛋白特异性抗体检测mbp标签标记的重组蛋白。
其余标签抗体还有v5、gfp、rfp、β-actin、β-tubulin、gapdh、erk1、au1、avi、b、cbp、ddddk、e、e2、glu-glu、hat、hpc4、hsv、kt3、klh、mat、protein a、s、s1、snap、srt、nwshpqfek、sumo、t7、tag-100、tap、trx、ty1、tf、universal、vsv-g等,但应用相对较少。
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